پایگاه آموزشی و اطلاع رسانی مهندسی پزشکی پایگاه آموزشی و اطلاع رسانی مهندسی پزشکی پایگاه آموزشی و اطلاع رسانی مهندسی پزشکی پایگاه آموزشی و اطلاع رسانی مهندسی پزشکی پایگاه آموزشی و اطلاع رسانی مهندسی پزشکی
به پایگاه آموزشی و اطلاع رسانی مهندسی پزشکی خوش آمدید.
چهارشنبه 22 آذر 1396
‪Google+‬‏
موضوعات سایت
آشنایی با مهندسی پزشکی

آشنایی با مهندسی پزشکی

آشنایی با گرایش بالینی

آشنایی با گرایش بیو مکانیک

آشنایی با گرایش بیو الکتریک

آشنایی با گرایش بیو متریال

آشنایی با تجهیزات پزشکی

آشنایی با تجهیزات پزشکی

آشنایی با تجهیزات آزمایشگاهی

آشنایی با تجهیزات رادیولوژی و تصویربرداری پزشکی

آشنایی با تجهیزات دندانپزشکی

آشنایی با تجهیزات چشم پزشکی

آشنایی با تجهیزات پزشکی هسته ای

آشنایی با تجهیزات پزشکی عمومی و اتاق عمل

آشنایی با تعمیر و نگهداری تجهیزات پزشکی

آشنایی با عیب یابی و تعمیر تجهیزات پزشکی

آشنایی با سرویس و کالیبراسیون تجهیزات پزشکی

اخبار و تازه های مهندسی پزشکی

اخبار و تازه های مهندسی پزشکی

مقالات مهندسی پزشکی

مقالات مهندسی پزشکی

مقالات گرایش بالینی

مقالات گرایش بیو مکانیک

مقالات گرایش بیو الکتریک

مقالات گرایش بیو متریال

جزوات دانشگاهی و نمونه سوالات امتحانی

جزوات دانشگاهی

نمونه سوالات امتحانی

معرفی کتاب ، نرم افزار و سایت

معرفی کتاب ، نرم افزار و سایت

ویدیو و انیمیشن آموزشی

ویدیو و انیمیشن آموزشی

دانلود فایل

دانلود فایل

دانلود مقاله

دانلود کتاب و کتابچه

دانلود مجله

دانلود جزوه

دانلود نمونه سوال امتحانی

دانلود نرم افزار

دانلود ویدیو

آرشیو
پشتیبانی سایت
نظرسنجی
به کدامیک از بخش های وبسایت بیشتر علاقمند هستید؟





جستجو
امکانات جانبی



در اين وبسایت
در كل اينترنت
:: .: تبلیغات ویژه :. ::
در تلگرام به ما بپیوندید


مؤسسه خیریه محک


راهنمای عضویت در سایت


https://www.facebook.com/bme711  

پروژه های دانشجویی پایگاه آموزشی و اطلاع رسانی مهندسی پزشکی

:: آخرین ارسال های انجمن ::

آشنایی با سيستم الايزا ريدر

الايزا ريدر يا خوانشگر الايزا كه به اسامي ميكروپليت ريدر و خوانشگر ميكروپليت فتومتريك نيز معروف است ، يك اسپكتروفتومتر تخصصي بوده كه به منظور قرائت نتايج تست اليزا طراحي شده است. اين وسيله به منظور تعيين حضور آنتي بادي ها يا آنتي‌ژن هاي اختصاصي در نمونه ها به كار مي‌رود. اين تكنيك بر اساس تشخيص يك آنتي‌ژن يا آنتي بادي ها روي يك سطح جامد به صورت مستقيم يا ثانويه به كمك آنتي بادي هاي نشاندار و ايجاد محصولاتي استوار است كه مي‌توانند توسط اسپكتروفتومتر خوانده شوند. واژه الايزا ELISA ، اختصاري از كلمات Enzyme-Linked  Immuno  sorbent  Assay است. 

 Elisa Reader

كاربرد ميكروپليت ريدر
مــيــكـــروپــلــيـــت ريــدر بــراي خــوانــدن نـتــايــج تست‌هاي الايزا مورد استفاده قرار مي گيرد. اين تـكـنـيــك كــاربــردي مـسـتـقـيــم در ايـمـنــولــوژي و سـرولـوژي دارد. از مـيـان كـاربـردهـاي ديگر اين وسيله به تاييد حضور آنتي بادي ها يا آنتي‌ژن‌هاي يك عامل عفوني در يك ارگانيزم ، آنتي بادي هاي يـك واكـسـن يـا اتـوآنـتـي بـادي هـا بـراي مـثال در آرتريت روماتوئيد مي توان اشاره كرد.

 

اصول كار
الايـزا ريـدر يـك اسپكتـروفتـومتـر اختصـاصي است. بر خلاف اسپكتروفتومترهاي معمولي كه قرائت جذب نوري را در گستره وسيعي از طول موج ها تسهيل مي كنند ، الايزا ريدر داراي فيلترها يا گريتينگ هاي انكساري بوده كه گستره طول موج ها را محدود كرده و معمولا بين 400 تا 750 نانومتر  عمل مي كنند. برخي از الايزا ريدرها در گستـره مـاوراء بنفـش عمـل كرده و قرائت را در مـحــدوده 340 تــا 700 نـانـومتـر انجـام مـي دهنـد. سـيـستم نوري موجود در اين دستگاه ها توسط تعدادي از كارخانه ها با استفاده از فيبرهاي نوري به منظور تامين نور جهت چاهك هاي حاوي نمونه در ميكرو پليت طراحي مي شود. ابتدا يك شعاع نوري از نمونه اي كه داراي قطري بين 1 تا 3 ميلي متر است عبور كرده و سپس يك سيستم آشكار كننده ، نور عبوري از نمونه را آشكار و تقويت مي كند. در مرحله بعد ، سيگنال مربوط به جذب نوري نمونه‌ها ثبت شده و سيستم خوانشگر نيز آن را به اطلاعاتي تبديل مي كند كه سبب تفسير نتايج تست مي شوند. برخي از الايزا ريدرها با استفاده از سيستم هاي شعاعي نوري دوتايي كار مي كنند.
نمونه هاي مورد آزمايش در پليت هايي كه به اين منظور طراحي شده اند و داراي تعداد خاصي چاهك هستند ، قرار مي گيرند. پليت هاي 8 ستوني همراه با 12 رديف كه در مجموع 96 چاهك را تشكيل مي دهند ، رايج تر از بقيه هستند. براي كاربردهاي اختصاصي تر ، تعداد چاهك ها افزايش مي يابد كه در برخي موارد تا پليت هاي 384 چاهكي را نيز شامل مي شود. افزايش تعداد چاهك ها به منظور كاهش مقدار مصرف معرف ها و نمونه ها است. موقعيت سنسور نوري الايزا ريدر بر اساس نوع كارخانه سازنده متغيير است ؛ به طوري كه در برخي موارد ممكن است در بالاي پليت حاوي نمونه و گاهي نيز مستقيما در زير پليت قرار گيرد. امروزه ميكرو پليت ريدرها داراي كنترل هايي هستند كه به وسيله ميكروپروسسورها تنظيم شده اند.

وسايل لازم جهت انجام تكنيک الايزا  
جهت انجام آزمايش الايزا تجهيزات زير مورد نياز است:
1- الايزا ريدر 
2- ميكرو پليت واشر (شستشو دهنده چاهك ها)
3- سيستم توزيع كننده مايع (در اين مورد ممكن است از پيپت ها چند كاناله استفاده شود)
4- انكوباتور

تجهيزات مورد نياز در انجام تست های الايزا
مراحل مكانيكي انجام تكنيك الايزا
يك تست اليزا به طور رايج شامل مراحل زير است:
1- شستشوي اوليه پليت كه ممكن است با استفاده از ميكرو پليت واشر انجام شود.
2- استفاده از يك توزيع كننده مايع (ديسپنسر) يا پيپت چند كاناله.
3- پليت در انكوباتور قرار داده مي شود كه داراي دماي كنترل شده بوده و واكنش ها در آن محل انجام مي شوند.
بسته به نوع تست ، مراحل 1 ، 2 و 3 ممكن است چـنـدين بار تكرار شوند تا اين كه معرف‌هاي اضافه شده ، واكنش ها را كامل كنند.
سـرانـجـام وقـتـي تـمـام مـراحـل انـكوباسيون كامل شد ، پليت به الايزا ريدر منتقل شده و سپس بـا قـرائـت جـذب نـوري نمونه ها ، نتيجه آن ها مشخص مي شود.

مراحل بيوشيميايی تكنيک اليزا
1- چــــاهــــك هــــاي مــــوجــــود در پــلــيــــت بــــا آنـتــي‌بــادي‌هــا و آنـتــي ژن هــا پــوشـيـده (Coat) مي‌شوند.
2- نـمــونــه هـا ، كـنـتـرل هـا و اسـتـانـداردهـا بـه چاهك‌ها اضافه شده و در دماي اتاق يا 37 درجه سـانتيگـراد بـراي يـك مـدت زمـاني معين ، طبق دستـورالعمـل تست انكوبه مي شوند. در طول انكـوباسيون ، بسته به حضور يا عدم حضور و مقدار آنتي ژن يا آنتي بادي موجود در نمونه ، آنتي ژن نمونه به آنتي بادي كوت شده به پليت يا آنتي بادي موجود در نمونه به آنتي ژن Coat شده در پليت باند مي شود.
3- پـــس از انـكـوبـاسـيــون ، آنـتــي ژن‌هـا يــا آنـتي‌بـادي‌هــاي آزاد ، شـستشـو داده شـده و بـا اسـتـفـــاده از مـيـكــرو پـلـيــت واشــر و يــك بــافــر شستشوي مناسب ، برداشته مي شوند.
4- در مرحله بعد ، يك آنتي بادي ثانويه به نام كونژوگه اضافه شده كه حاوي آنزيمي است كه به منظور ايجاد يك تغيير رنگي ، با يك سوبسترا واكنش خواهد داد.
5- ســـپــــس يــــك دوره زمــــانــــي ثــــانــــويــــه از انـكــوبــاسـيـون شـروع مـي شـود كـه در طـي آن ، كـونـژوگـه بـا كمپلكس آنتي ژن- آنتي بادي در چاهك ها پيوند برقرار خواهد كرد.
6- پس از انكوباسيون ، يك دوره شستشوي جديد انجام مي شود كه سبب برداشت كونژوگه متصل نشده از چاهك ها خواهد شد.
7- در مرحله بعد ، سوبسترا اضافه مي شود. آنـزيـم بـا سـوبستـرا واكنش خواهد داد و سبب تغيير رنگ محلول خواهد شد. اين واكنش نشان خواهد داد كه چه مقدار كمپلكس آنتي‌ژن- آنتي بادي در پايان تست وجود خواهد داشت. 
8- وقتي كه زمان انكوباسيون كامل مي شود، يك معرف براي توقف واكنش آنزيم- سوبسترا به آن اضافه شده كه از تغييرات بيشتر در شدت رنگ ايجاد شده، جلوگيري مي‌كند. اين معرف عموما يك اسيد رقيق است. 
9- در پايان ، پليت بوسيله الايزا ريدر خوانده مي شود. نتايج حاصله براي تعيين مقادير اختصاصي يا حضور آنتي ژن ها يا آنتي بادي ها در نمونه به كار برده مي شوند.
تــوجـه: بـرخـي از چـاهـك هـا بـراي استـانـداردهـا و كنتـرل هـا استفـاده مـي شـونـد. استانداردها براي تعريف نقاط cut-off به كار برده مي شوند. استانداردها و كنترل ها مـقـادير معيني هستند و براي اندازه گيري نتايج تست و ارزيابي اطلاعات در مقابل غلظت‌هاي مشخصي براي هر كنترل به كار برده مي شوند. فرايند توصيف شده در بالا عمومي است ؛ اگرچه بسياري از تست هاي الايزا وجود دارند كه همراه با مراحل يا متغيرهاي اختصاصي هستند.


نصب تجهيزات 
به منظور عملكرد صحيح الايزا ريدر ، نكات زير لازم است تا رعايت شود:
1- يك محيط تميز و عاري از گرد و غبار
2- يك ميز كار ثابت و به دور از تجهيزاتي از قبيل سانتريفوژ ، شيكر و ... كه سبب لرزش آن مي شوند. اين ميز بايد داراي اندازه مناسبي باشد ، به طوري كه در كنار الايزا ريدر ، فضاي كاري مناسبي وجود داشته باشد. تجهيزات تكميلي مورد نياز براي انجام تكنيك توصيفي بالا عبارتند از: واشر ، انكوباتور ، ديسپنسر و كامپيوتر همراه با وسايل جانبي آن.
3- يك منبع تغذيه الكتريكي كه سازگار با استانداردها و معيارهاي كشور باشد. در كشورهاي آمريكايي به طور مثال ، عموماً فركانس هاي 60 هرتز و 110 ولت استفاده مي‌شود ؛ در حالي كه در نواحي ديگر از جهان 220 تا 240 ولت و 50 تا 60 هرتز به كار برده مي شود.

Elisa Reader

كاليبراسيون الايزا ريدر
كاليبراسيون الايزا ريدر يك مرحله اختصاصي است كه بايد توسط يك تكنسين يا مهندس آموزش ديده كه به دستورالعمل هاي سازنده دستگاه آشنايي دارد ، انجام شود. بـراي انجـام كاليبراسيون ، داشتن يك مجموعه از فيلترها كه از لحاظ اندازه ، يكسان هستند ، الزامي است. سازندگان اين دستگاه ها ، پليت هاي كاليبراسيون را براي هر طول موجي كه دستگاه به كار مي برد فراهم مي كنند.
پليت هاي كاليبراسيون مجهز به حداقل سه مقدار جذب نوري از قبل تعيين شده (پايين ، متوسط و مقدار بالا) در دامنه اندازه گيري هستند.

براي انجام كاليبراسيون مراحل زير را بايد دنبال كرد:
1- پليت كاليبراسيون را روي دستگاه قرار دهيد.
2- يـك خـوانـش كـامـل را بـا پليـت كـاليبراسيون انجام دهيد. مشخص كنيد كه آيا تفاوت‌هايي در قرائت هاي به دست آمده از يك چاهك به چاهك ديگر وجود دارد يا خير. چنانچه اختلافي مشاهده شد ، پليت را به اندازه 180 درجه چرخانده و قرائت را مجددا تكرار كنيد تا از اختلافاتي كه به خود پليت نسبت داده مي شوند ، جلوگيري كنيد. به طور كلي ، اگر نتايج پليت در دو طول موج به ميزاني باشد كه انتظار داريم ، گفته مي‌شود كه دستگاه به كاليبراسيون ديگري احتياج ندارد.
3- تأييد كنيد آيا خوانشگر به كاليبراسيون احتياج دارد يا خير. چنانچه به كاليبراسيون احتياج دارد ، راهنمايي هاي رايج كارخانه سازنده دستگاه را براي كاليبراسيون دنبال كنيد. تأييد كنيد كه خطي بودن (linearity) خوانشگر تا حد امكان قابل قبول است.
4- اگــر دستگـاه حـاوي يـك پليـت كـاليبـراسيـون نيسـت ، يـك محلـول رنگـي را در چاهك‌هاي يك پليت از آن ريخته و فوري نتايج را قرائت كنيد. سپس پليت را به اندازه 180 درجه چرخانده و دوباره قرائت را انجام دهيد. اگر هر دو خوانش ها و ميانگين مقادير در هر رديف يكسان هستند ، خوانشگر كاليبر است.
5- تاييد كنيد كه خوانشگر به صورت ستون به ستون نيز كاليبر است. يك پليت تميز و خالي را  در محل مخصوص قرار دهيد و قرائت را انجام دهيد. اگر اختلافي بين هر يك از خوانش هاي ميانگين از اولين تا آخرين ستون وجود ندارد، مي توان فرض را بر اين گذاشت كه خوانشگر كاليبر است.

حفظ و نگهداری رايج
الف) ‌نـگـهــداري اســاســي (تـكـرار بـه صـورت روزانه)
1- مـرور ايـنـكـه سنسورهاي نوري هر كانال تـمـيـز هـسـتـنـد. چـنـانـچـه كـثـيـف هـستند ، سطح پنجره‌‌هاي عبور دهنده نور و سنسورها را با يك برس كوچك تميز كنيد.
2- تأييد كنيد كه سيستم نوري تميز  است.
3- تأييد كنيد كه كاليبراسيون خوانشگر كافي اسـت. وقـتـي كـارهـاي روزانه شروع مي شود ، اجـازه دهـيد تا خوانشگر براي مدت 30 دقيقه گرم شود. در مرحله بعد ، قرائت Blank را انجام دهـيـد و سـپـس يـك پـليت كامل از سوبسترا را قـرائـت كـنـيـد. خـوانـش هـا مـي بـايـست يكسان بـاشند. اگر اين طور نبود ، پليت را چرخانده و قرائت را به منظور تعيين اين كه آيا اختلاف در پليت يا در خوانشگر است ، تكرار كنيد.
4- سـيـسـتــم كـشـنــده اتــومــاتـيــك اســلايــدهـا (Automatic drawer sliding system) را بــررسـي كنيد كه بايد نرم و ثابت باشد.

ب) ‌نـگـهـداري بـازدارنـده (تـكـرار هـر سه ماه يكبار)
1- پـــايـــداري لامـــپ را تـــأيـيــد كـنـيــد. پـلـيــت كاليبراسيون را به كار برده ، قرائت را با فاصله 30 دقيقه مجدداً با همان پليت انجام دهيد. قرائت ها را مقايسه كنيد كه هيچ تفاوتي نبايد ميان آن ها مشاهده شود.
2- سيستم نوري دتكتور و سيستم هاي نوري را تميز كنيد.
3- كشنده پليت (Plate drawer) را تميز كنيد.
4- مكان قرار گيري هر چاهك را با استفاده از سـيـسـتـم هـاي انتشار نور و آشكاركننده تأييد كنيد.

 

منبع: ماهنامه مهندسی پزشکی

 

 

کلمات کلیدی: biomedical engineering ، مهندسی پزشکی ، آشنایی با مهندسی پزشکی ، معرفی مهندسی پزشکی ، مهندسی پزشکی گرایش بالینی ، مهندسی پزشکی گرایش بیومکانیک ، مهندسی پزشکی گرایش بیوالکتریک ، مهندسی پزشکی گرایش بیومتریال (بیومواد) ، مهندسی پزشکی ایران ، مهندسی پزشکی دانشگاه پیام نور ، پایگاه آموزشی و اطلاع رسانی مهندسی پزشکی ، اخبار و تازه های مهندسی پزشکی ، مقالات مهندسی پزشکی ، آموزش مهندسی پزشکی ، دانلود کتاب های مهندسی پزشکی ، دانلود جزوه های مهندسی پزشکی ، دانلود نمونه سوالات امتحانی مهندسی پزشکی ، الایزا ریدر ، Elisa Reader ، الیزا ، میکروپلیت ریدر ، اسپکتروفتومتر ، آنتی ژن ، آنتی بادی ، واشر ، بیوشیمی ، کالیبراسیون ، کالیبراسیون الایزا ریدر



http://www.bme711.ir/post/119" rel="nofollow">

نویسنده : آرمین مقصودلو
[ شنبه 11 شهريور 1391 ]
بازدید : 10533


:: نظر بدهید ::
نام
ایمیل (منتشر نمی‌شود) (لازم)
وبسایت
:) :( ;) :D ;)) :X :? :P :* =(( :O @};- :B /:) :S
نظر خصوصی
مشخصات شما ذخیره شود ؟ [حذف مشخصات] [شکلک ها]
کد امنیتی
آخرین مطالب
ورود کاربران
نام کاربری :
رمز عبور :

رمز عبور را فراموش کردم ؟
عضويت سريع
نام کاربری :
رمز عبور :
تکرار رمز :
ایمیل :
نام اصلی :
کد امنیتی : * کد امنیتیبارگزاری مجدد
مطالب پربازدید
مطالب تصادفی
پیوندهای روزانه
لینک دوستان
خبرنامه
برای اطلاع از بـروزرسانی سایت و نیز آخرین اخبار و مقالات مهندسی پزشکی، آدرس ایمیل خود را وارد کرده و در خبرنامه سایت عضو شويد تا جديدترين مطالب به ايميل شما ارسال شود.

آمار سایت
آمار مطالب
کل مطالب : 402
کل نظرات : 58
آمار کاربران
افراد آنلاین : 11
تعداد اعضا : 11218

کاربران آنلاین

آمار بازدید
بازدید امروز : 1,593
باردید دیروز : 2,554
ورودی گوگل امروز : 237
ورودی گوگل دیروز : 405
بازدید هفته : 6,522
بازدید ماه : 25,254
بازدید سال : 807,560
بازدید کلی : 3,150,862

تمامی حقوق این وبسایت و مطالب آن متعلق به پایگاه آموزشی و اطلاع رسانی مهندسی پزشکی می باشد. قدرت گرفته از سرورهای قدرتمند PouyaSazan - طراحی و کد نویسی قالب توسط : seVen Design